Резидентная микрофлора полости рта

Резидентная микрофлора полости рта включает представителей всех классов микроорганизмов: бактерий, актиномицетов, спирохет, грибов, простейших, а также вирусов. Преобладают бактерии, причем около 90 % микробных видов составляют анаэробы. Наиболее обширная группа бактерий, населяющих полость рта, кокковидные формы.

Постоянная микрофлора полости рта: кокки

Стрептококки. Являются одними из основных обитателей полости рта. Обнаруживаются у 100 % людей в слюне (в 1 мл до 108 — 109 стрептококков) и в десневых карманах.

Стрептококки имеют шаровидную или овальную форму, грамположительны, неподвижны, не образуют спор. В мазках из культур на плотных средах располагаются попарно или короткими цепочками, в препаратах из бульонных культур — длинными цепочками и скоплениями. По типу дыхания относятся к факультативным анаэробам, встречаются и облигатные анаэробы (пептострептококки). Температурные границы роста варьируют в зависимости от вида, оптимальная температура — около 37 °С.

Пептострептококки — облигатные анаэробы — являются постоянными обитателями полости рта. Различают 13 видов пептострептококков. Они играют большую роль при смешанной инфекции, так как усиливают патогенное действие других микроорганизмов.

На простых средах не растут или дают очень скудный рост. Для культивирования стрептококков к средам прибавляют кровь, сыворотку, асцитическую жидкость, глюкозу. Стрептококки образуют мелкие (диаметром около 1 мм), полупрозрачные, сероватые или бесцветные колонии. В бульоне характерен придонно-пристеночный рост. На средах с кровью могут вызывать гемолиз эритроцитов. По характеру гемолиза делятся на три группы: 1) р-гемолитические — колонии окружены зоной полного гемолиза; 2) а-гемолитические (зеленящие) — вызывают частичный гемолиз вокруг колоний и дают зеленоватое окрашивание, обусловленное превращением гемоглобина в метгемоглобин; 3) у-стрептококки — не обладают гемолитической активностью.

Ферментируют углеводы с образованием почти исключительно молочной кислоты, обусловливая молочнокислое брожение. Благодаря этому являются сильными антагонистами по отношению ко многим гнилостным бактериям, встречающимся в полости рта.

Стрептококки продуцируют ряд экзотоксинов и ферментов агрессии (гемолизин, лейкоцидин, эритрогенный токсин, гиалуронидазу, стрептокиназу, О- и S-стрептолизины и др.).

Стрептококки имеют сложную антигенную структуру. Известно 17 серологических групп стрептококков, обозначаемых заглавными латинскими буквами от А до S. В клеточной стенке находится группоспецифический полисахаридный С-антиген (гаптен), составляющий примерно 10 % сухой массы клетки. Существуют стрептококки, не содержащие группового С-антигена и не принадлежащие поэтому ни к одной из 17 серологических групп. Стрептококки, не имеющие группоспецифического С-антигена, постоянно обнаруживаются в полости рта. Все они зеленящие или негемолитические, лишены таких признаков патогенности, как способность продуцировать стрептолизины, стрептокиназу. Однако именно эти стрептококки чаще всего являются причиной воспалительных процессов в полости рта. Типичными представителями стрептококков, не имеющих группового С-антигена, являются S. salivarius и S. mitis, кото-рые в 100 % случаев обнаруживаются в полости рта. Характерной особенностью S. salivarius является образование капсулы как результат синтеза вязких полисахаридов из сахарозы. В местах наиболее частой локализации кариеса (в области фиссур, на проксимальных поверхностях зубов) обнаруживается S. mutans, трудно дифференцируемый от S. salivarius. Полагают, что S. mutans играет ведущую роль в возникновении кариеса зубов. Помимо стрептококков, лишенных группового антигена, в полости рта обнаруживаются представители почти всех 17 групп, но они встречаются менее постоянно и в значительно меньшем количестве.

Стафилококки. Обнаруживаются в слюне в 80% случаев, часто в зубодесневых карманах. Клетки имеют сферическую форму, располагаются скоплениями, напоминающими грозди винограда (Staphylon — гроздь). Грамположительны, неподвижны, не образуют спор. Растут при температуре от 7 до 46 °С, температурный оптимум 35- 40 С. Факультативные анаэробы. Неприхотливы, хорошо растут на простых питательных средах, образуя колонии средних размеров, круглые, гладкие, выпуклые, различных оттенков желтого или белого цвета (в зависимости от продуцируемого пигмента). На жидких средах дают равномерное помутнение.

Обладают выраженной ферментативной активностью. Сбраживают многие углеводы с образованием кислоты. Расщепляют белки с выделением сероводорода. Индол не образуют.

По современной классификации род Staphylococcus разделен на три вида: 1) S. aureus; 2) S. epidermidis; 3) S. saprophyticus. Золотистые стафилококки (S. aureus) обладают рядом признаков патогенности. В отличие от других видов стафилококка они коагулируют цитратную плазму и ферментируют маннит в анаэробных условиях. В полости рта здоровых людей (на деснах, в зубном налете) обнаруживаются преимущественно S. epidermidis. У некоторых лиц в полости рта могут присутствовать и золотистые стафилококки. Однако значительно чаще S. aureus локализуются, на слизистой оболочке передних отделов полости носа и сли-зистой глотки, обусловливая бактерионосительство. При соответствующих условиях они могут явиться причиной гнойно-воспалительных процессов в полости рта. Вследствие выраженной ферментативной активности стафилококки принимают участие в расщеплении остатков пищи в полости рта.

Вейлонеллы. Бактерии рода Veillonella представляют собой мелкие грамотрицательные кокки. Клетки имеют сферическую форму, в мазках располагаются попарно, в виде скоплений или коротких цепочек. Неподвижны, не образуют спор.

Облигатные анаэробы. Хорошо растут при 30-37 °С. На плотных питательных средах, образуют колонии 1-3 мм в наибольшем измерении. Колонии гладкие, маслянистые, серовато-белого цвета, по форме чечевицеобразные, ромбовидные или сердцевидные. Относятся к хемоорганотрофам со сложными пищевыми потребностями.

Не ферментируют углеводы и многоатомные спирты. Не разжижают желатин, не образуют индол, не обладают гемолитической активностью. Продуцируют сероводород. Культуры издают характерный зловонный запах.

Вейлонеллы содержат эндотоксины липополисахаридной природы. В полости рта обнаружено два вида этих кокков: Veillonella parvula и Veillonella alcalescens, которые постоянно присутствуют в большом количестве (в 1 мл слюны до 107— 108 ). Количество их возрастает при гнойно-воспалительных процессах в полости рта, особенно при альвеолярной пиорее и одонтогенных абсцессах.

Нейссерии. Грамотрицательные диплококки бобовидной формы. Род Neisseria объединяет сапрофитные и патогенные микроорганизмы (к патогенным относятся менингококки и гонококки).

Сапрофитные нейссерии всегда в большом количестве встречаются в полости рта здоровых людей (1—3 млн в 1 мл слюны). Все они являются аэробамии (за исключением N. discoides). В отличие от патогенных сапрофитные нейссерии хорошо растут на простых питательных средах даже при комнатной температуре. Оптимальная температура роста 32...37 °С. Различают пигментообразующие виды: N. flavescens. N. pharyngis — пигмент различных оттенков желтого цвета и не образующие пигмента (N. sicca). В биохимическом отношении нейссерии малоактивны — сбраживаются лишь немногие углеводы.

Бранхамеллы. Представляют собой кокки, обычно располагаются попарно. Грамотрицательны, неподвижны, не образуют спор. По типу дыхания относятся к аэробам. Температурный оптимум — около 37 °С. Растут на обычных средах. Углеводы не ферментируют.

В полости рта обнаруживается Branhamella catarrhalis. В мазках со слизистой оболочки часто располагаются внутри лейкоцитов. В. catarrhalis чаще всего обнаруживаются в пульпе и периодонте при остром серозном воспалении. Они усленно размножаются при катаральном воспалении слизистой оболочки полости рта и верхних дыхательных путей.

Постоянная микрофлора полости рта: палочки

Помимо кокковой микрофлоры обитателями полости рта являются разнообразные палочковидные формы бактерий.

Молочнокислые бактерии (лактобациллы). У 90 % здоровых людей в полости рта обитают молочнокислые бактерии (в 1 мл слюны содержится 103—104 клеток). Бактерии рода Lactobacillus представляют собой палочки. Часто образуют цепочки. Неподвижны, не образуют спор и капсул. Грамположительны, при старении культуры и при повышении кислотности становятся грамотрицательными. Могут расти при температуре от 5 до 53 °С, оптимальная температура +30.. .40 °С. Кислотолюбивые, оптимум рН 5,5—5,8. Микроаэрофилы в анаэробных условиях растут значительно лучше, чем в аэробных. Требовательны к питательным средам. Для их роста необходимы некоторые аминокислоты, витамины, соли, жирные кислоты и др. На элективных питательных средах колонии мелкие, бесцветные, уплощенные.

По сахаролитическим свойствам отличаются друг от друга, на основании этого различают гомоферментативные и гетероферментативные виды. Гомоферментативные виды (Lactobacillus casei, L. Lactis) при сбраживании углеводов образуют только молочную кислоту. Гетероферментативные виды (L fermentum, L. brevis) продуцируют около 50% молочной кислоты, 25% С02 и 25 % уксусной кислоты и этилового спирта.

Благодаря образованию большого количества молочной кислоты лактобациллы являются антагонистами других микробов: стафилококков, Е. coli и других энтеробактерий. Антагонистические свойства молочнокислых бактерий были замечены еще И. И. Мечниковым, который предложил употреблять про-стоквашу из молока, заквашенного L. bulgaricus, для подавления гнилостных бактерий в кишечнике.

До 90% обитающих в полости рта лактобацилл относятся к L. casei и L. fermentum. Молочнокислые палочки не обладают патогенными свойствами, однако их количество резко возрастает при кариесе зубов. Для оценки активности кариозного процесса даже предложен «лактобациллентест» — определение количества лактобацилл.

Постоянная микрофлора полости рта: другие формы бактерий

Бактероиды. В полости рта здоровых людей всегда присутствуют бактероиды — анаэробные грамотрицательные неспорообразующие палочки, относящиеся к семейству Bacteroidaceae. Отличаются большим полиморфизмом — могут иметь палочковидную, нитевидную или кокковидную форму. Не об-разуют капсул. Большинство видов неподвижно. Растут на средах с добавлением белка (крови, сыворотки, асцитической жидкости). Ферментируют углеводы с образованием янтарной, молочной, масляной, пропионовой и других кислот.

Семейство Bacteroidaceae включает несколько родов. Обитателями полости рта являются представители родов Васteroides, Fusobacterium, Leptotrichia. Собственно Bacteroides регулярно обнаруживаются в полости рта (тысячи микробных клеток в 1 мл слюны). Наиболее распространенными видами являются В. melaninogenicus, В. oralis, В. fragilis и др.

Количество бактероидов увеличивается при различных гнойно-воспалительных процессах ротовой полости (в нагноившихся зубных гранулемах, при остеомиелите челюстей, актиномикозе, а также при гнойно-воспалительных процессах в других органах — легких, почках и т. д.). Нередко бактероиды обнаруживаются в сочетании с другими микроорганизмами, преимущественно анаэробными. В fundiliformis продуцирует экзотоксин.

Бактерии рода Fusobacterium представляют собой веретенообразные палочки с заостренными концами. В цитоплазме содержат гранулы, которые окрашиваются грамположительно, тогда как сама цитоплазма — грамотрицательно. Неподвижны, не образуют спор и капсул. Фузобактерии различаются по сахаролитической и протеолитической активности. К сахаролитической группе относятся F. plauti и некоторые другие. Они сбраживают углеводы с образованием большого количества кислоты. Непатогенны для животных. Протеолитические виды (F. nucleatum, F. biacutum) расщепляют белки с образованием сероводорода, культуры издают гнилостный запах. Иногда патогенны (вызывают перитонит, абсцессы).

Фузобактерии постоянно присутствуют в полости рта (в 1 мл слюны содержится несколько десятков тысяч микробов). Их количество резко возрастает при различных патологических процессах (при ангине Венсана, гингивите, стоматите — в 1000—10000 раз). Фузобактерии находятся в кариозном дентине, в десневых карманах при пародонтите.

Бактерии рода Leptotrichia представляют собой крупные, прямые или слегка изогнутые палочки с закругленными или чаще заостренными концами. Образуют нити, которые могут переплетаться друг с другом. Неподвижны, не образуют спор и капсул, грамотрицательны. Облигатные анаэробы. Растут на средах с добавлением сыворотки или асцитической жидкости. Ферментируют углеводы с образованием молочной кислоты. Известно большое количество видов лептотрихий, все они содержат общий антиген, который обнаруживается с помощью реакции связывания комплемента (РСК). В полости рта присутствуют постоянно и в большом количестве (103—104 клеток в 1 мл слюны). Чаще локализуются у шейки зуба. Матрикс (органическая основа) зубного камня состоит главным образом из лептотрихий. Представителем лептотрихий — обитателей полости рта — является L. buccalis.

Актиномицеты. Обнаруживаются в слюне практически у 100 % людей, очень часто встречаются в десневых карманах. Актиномицеты представляют собой группу нитчатых бактерий. По Международной классификации выделены в самостоятельную группу, порядок Actinomycetales семейство Actinomycetaceae. В эту же группу входят родственные микроорганизмы — Корине- и микобактерии.

Актиномицеты грамположительны, имеют тенденцию образовывать разветвленные нити в тканях или на питательных средах. Нити тонкие (диаметр 0,3—1 мкм), не имеют перегородок, легко фрагментируются, что приводит к образованию палочковидных или кокковидных форм. Неподвижны, не образуют спор в отличие от бактерий сем. Streptomycetaceae.

По типу дыхания относятся к факультативным анаэробам, большинство предпочитает анаэробные условия. Растут при температуре от 3 до 40 °С, оптимальная температура 35— 37 °С.

Культивируют актиномицеты на средах, содержащих сыворотку, кровь, асцитическую жидкость, экстракты органов (сердца, мозга). Рост медленный, зрелые колонии формируются на 7-15-й день. Колонии мелкие (0,3—0,5 мм), реже крупные, могут иметь гладкую или складчатую, бугристую поверхность. Консистенция колоний кожистая или крошковатая, некоторые колонии с трудом отделяются от питательной среды. Образуют пигмент, благодаря этому колонии могут быть окрашены в черновато-фиолетовый, оранжевый, зеленоватый, белый, коричневый цвет. На жидких средах растут в виде пленки на поверхности или в виде осадка. Сбраживают углеводы с образованием кислоты. Протеолитической активностью обычно не обладают.

Актиномицеты являются обитателями кожи и слизистых оболочек, они присутствуют в зубном налете, на поверхности десен, в зубодесневых карманах, в кариозном дентине, в криптах миндалин. В полости рта обычно обнаруживаются A. Israeli!, A. viscosus. Количество актиномицетов резко возрастает при различных стоматологических заболеваниях, сопровождающихся увеличением числа анаэробных микроорганизмов. Могут вызывать поражение различных тканей и органов, получившего название актиномикоз.

У здоровых людей в полости рта обнаруживается целый ряд других палочковидных и извитых форм: коринебактерии (дифтероиды), гемофильные бактерии (Haemophilus influenzae — палочка Афанасьева-Пфейффера), анаэробные вибрионы (Vibrio sputorum), спириллы (Spirillum sputigenum) и др.

Спирохеты. У любого здорового человека в полости рта обитает большое количество сапрофитных спи-рохет. Они обнаруживаются преимущественно в десневых карманах. Клетка спирохеты состоит из осевых фибрилл, образующих осевую нить, и протоплазматического цилиндра, спирально завитого вокруг нити. Протоплазматический цилиндр и осевые фибриллы заключены во внешнюю оболочку. Осевые фибриллы прикреплены к концам протоплазматического цилиндра, от места прикрепления они тянутся к противоположному полюсу клетки, могут выходить за концы протоплазматического цилиндра, создавая впечатление жгутиков, однако в отличие от истинных жгутиков они заключены во внешнюю оболочку. Спирохеты подвижны. Совершают движения трех типов: вращательное, сгибательное, волнообразное.

В полости рта постоянно находятся сапрофитные спирохеты, относящиеся к трем родам семейства Spirochaetaceae:

Borrelia;
Treponema;
Leptospira.

Боррелии представляют собой спиральные клетки с 3- 10 крупными, неровными витками. Грамотрицательны. По Романовскому-Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Облигатные анаэробы. Обитателем полости рта является Borrelia buccalis.

Трепонемы имеют вид туго закрученных спиралей. Завитки равномерные, мелкие. Грамотрицательны. Строгие анаэробы. В полости рта присутствуют: Treponema macrodentium, Т. microdentium (по морфологии очень сходна с возбудителем сифилиса Т. pallidum), T. vincentii.

Лептоспиры представлены в полости рта Leptospira dentium. По морфологическим признакам L dentium не отличается от других представителей рода. Клетки имеют форму спиралей с мелкими витками. Один или оба конца могут быть загнуты в виде крючка. Облигатные аэробы.

В чистой культуре спирохеты, встречающиеся в полости рта, не патогенны для человека и животных. Они вызывают патологические процессы в сочетании с другими микроорганизмами, кокками, фузобактериями, вибрионами. Большое количество спирохет, обнаруживается при язвенном стоматите, ангине Венсана, в зубодесневых карманах при тяжелых формах пародонтита, в кариозных очагах и некротизированной пульпе.

Постоянная микрофлора полости рта: грибы

Дрожжеподобные грибы рода Candida распространены повсеместно. Постоянно обнаруживаются в микробных ассоциациях на коже, слизистых оболочках открытых полостей человека, в кишечнике. Род Candida включает около 100 видов, большинство которых не патогенны для человека. Имеются и условно-патогенные виды, способные вызвать заболевания при снижении защитных сил организма. К ним относятся С. albicans, С. krusei, С. tropicalis, С. pseudotropicalis и др. Клетки грибов рода Candida могут быть округлой, овоидной, цилиндрической, иногда неправильной формы, диаметр их колеблется от 5 до 8 мкм; относятся к аэробам; грамположительны. Размножаются многополюсным почкованием. Не имеют истинного мицелия, образуют псевдомицелий, состоящий из цепочек удлиненных клеток. Оптимальная температура роста 30-37 °С, несколько медленнее растут при комнатной температуре.

Могут культивироваться на простых питательных средах, лучше растут на средах, содержащих углеводы, сыворотку, кровь, асцитическую жидкость. Наиболее распространенной элективной средой является среда Сабуро (в ее состав входят глюкоза или мальтоза и дрожжевой экстракт). На плотных средах образуют крупные сметанообразные колонии желтовато-белого цвета с гладкой или шероховатой поверхностью. Характерно врастание грибов в питательную среду. Созревание колоний происходит к 30-му дню. На жидких средах растут в виде пленки и мелких зерен на дне и стенках пробирки. Ферментируют многие углеводы до кислоты и газа, разжижают желатин, но очень медленно.

Антигенная структура довольно сложная. Клетки грибов являются полноценными антигенами, в ответ на них в организме развивается специфическая сенсибилизация, и вырабатываются соответствующие антитела.

Дрожжеподобные грибы обнаруживаются в полости рта здоровых людей (в 1 мл слюны 102—103 клеток), причем наблюдается тенденция к их более широкому распространению. Так, в 1933 г. С. albicans были выделены из полости рта у 6 % здоровых людей, в 1939 — у 24 %, в 1954 — у 39 %. В настоящее время эти грибы встречаются в 40-50 % случаев в полости рта здоровых людей. При снижении реактивности организма грибы рода Candida способны вызывать заболевания, которые получили название кандидозов или кандидамикозов.

Постоянная микрофлора полости рта: простейшие

У 45-50 % здоровых людей обитателем полости рта является Entamoeba gingivalis. Эти микроорганизмы обнаруживаются преимущественно в десневых карманах, криптах миндалин, зубном налете. Е. gingivalis имеет диаметр 20-30 мкм, очень подвижна, лучше видна в нативном неокрашенном препарате (раздавленная капля). Аэроб. Культивируют на кровяном или сывороточном агаре, покрытом слоем раствора Рингера с добавлением триптофана (1:10 000).

У 10-20 % людей в полости рта обитает Trichomonas elongata (Trichomonas tenax), имеет грушевидную форму длиной 7—20 мкм. На переднем конце расположены четыре жгутика, отходящие от базальных зерен. Один из жгутиков окаймляет ундулирующую мембрану. У основания жгутиков имеется щелевидное углубление. Предполагают, что оно служит для захвата пищи (бактерий). Трихомонады подвижны, хорошо видны в живом состоянии в неокрашенных препаратах. Культивируют их так же, как и амеб.

Амебы и трихомонады усиленно размножаются при негигиеническом содержании полости рта, а также при гингивитах и пародонтите.

Список литературы

Боровский Е.В., Машкиллейсон А.Л. «Заболевания слизистой оболочки полости рта и губ» М, 2001.
Боровский Е.В., Данилевский Н.Ф. «Атлас заболеваний слизистой оболочки полости рта» М, 1991.
Боровский Е.В., Леонтьев В.К. «Биология полости рта» Н.Н., НГМА, 2001.
Магид Е.А., Мухин Н.А. «Фантомный курс терапевтической стоматологии» М, 1996.
Иванов В.С. «Заболевания пародонта» М, 2001.
Бибик С.М. «Клиническая анатомия зубов» М,2000.
«Заболевания пародонта». Атлас под ред. Данилевского Н.Ф., М, 1999.
«Болезни полости рта». Под ред. Л.М.Лукиных, НГМА, 2004.
«Терапевтическая стоматология» М., МИА, 2004.